一位神经生理学家对编码人脑细胞中一种神经递质蛋白的基因发生了兴趣。他已经知道这种蛋白质的氨基酸序列。
一位神经生理学家对编码人脑细胞中一种神经递质蛋白的基因发生了兴趣。他已经知道这种蛋白质的氨基酸序列。请问,他如何识别只在某种特定脑细胞中表达的基因?他如何识别编码神经递质的基因?他如何得到大量基因的拷贝?他如何生产这种神经递质?
请帮忙给出正确答案和分析,谢谢!
参考解答
正确答案:识别特定的基因通常采用分子杂交的方法也就是合成一小段与该基因部分序列互补并被放射性同位素标记的单链DNA探针对克隆的基因文库进行杂交实验使该基因被同位素标记而被识别因此还要具备相应的基因文库。 根据已知的该神经递质氨基酸序列由遗传密码推测出它的一段DNA序列合成探针再进行分子杂交。 要得到大量目的基因的拷贝可以采用基因克隆的方法即将该目的基因与合适的载体连接形成重组DNA分子转化进入细菌等宿主细胞并通过培育宿主细胞使该基因随宿主的繁殖而大量复制。生产这种神经递质可以通过重组DNA技术将目的基因导人大肠杆菌等便于培养的宿主对大肠杆菌进行大量培养使该目的基因在大肠杆菌中大量表达与积累通过对表达产物的分离纯化得到这种神经递质产品。
识别特定的基因,通常采用分子杂交的方法,也就是合成一小段与该基因部分序列互补并被放射性同位素标记的单链DNA探针对克隆的基因文库进行杂交实验,使该基因被同位素标记而被识别,因此还要具备相应的基因文库。根据已知的该神经递质氨基酸序列由遗传密码推测出它的一段DNA序列,合成探针,再进行分子杂交。要得到大量目的基因的拷贝,可以采用基因克隆的方法,即将该目的基因与合适的载体连接形成重组DNA分子,转化进入细菌等宿主细胞,并通过培育宿主细胞,使该基因随宿主的繁殖而大量复制。生产这种神经递质,可以通过重组DNA技术将目的基因导人大肠杆菌等便于培养的宿主,对大肠杆菌进行大量培养使该目的基因在大肠杆菌中大量表达与积累,通过对表达产物的分离纯化,得到这种神经递质产品。
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