将Asp(pI=2.98) Gly(pI=5.97) Thr(pI=6.53) Leu(pI=5.9
将Asp(pI=2.98),Gly(pI=5.97),Thr(pI=6.53),Leu(pI=5.98)和Lys(pI=9.74)溶于 pH3.0的柠檬酸缓冲液中,加到用同种缓冲液平衡的Dowex-50阳离子交换树脂中。然后,用提高离子强度的线性梯度缓冲液洗脱,这5种氨基酸从柱上洗脱出来的顺序怎样?
请帮忙给出正确答案和分析,谢谢!
参考解答
正确答案:[解因Asp在pH3.0时静电荷接近于0与树脂不发生吸附所以最先洗脱下来。三种中性氨基酸中Thr虽有较高的△P但由于含有一个-OH所以具有较高的极性减弱与树脂的吸附能力因此它在Gly和Leu之前洗脱下来。Gly和Leu具有几乎相同的△P但是Gly的极性较Leu强所以Gly的洗脱位置在第三Leu在第四。而Lys在四种氨基酸中由于具有最高的△P带较高的有效正电荷只有在增加洗脱液的离子强度或提高溶液的DH时才能被洗脱下来。
[解因Asp在pH3.0时,静电荷接近于0,与树脂不发生吸附,所以最先洗脱下来。三种中性氨基酸中,Thr虽有较高的△P,但由于含有一个-OH,所以具有较高的极性,减弱与树脂的吸附能力,因此它在Gly和Leu之前洗脱下来。Gly和Leu具有几乎相同的△P,但是Gly的极性较Leu强,所以,Gly的洗脱位置在第三,Leu在第四。而Lys在四种氨基酸中由于具有最高的△P,带较高的有效正电荷,只有在增加洗脱液的离子强度或提高溶液的DH时,才能被洗脱下来。
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